【題目】研究人員利用小鼠(2N40)的單倍體ES細胞(只含一個染色體組),成功培育出轉基因小鼠。其主要技術流程如下圖所示:

注:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四種限制酶,箭頭指向的位置為限制酶的切割位置,Ampr是氨芐青霉素抗性基因,NeorG418抗性基因。

1)重組質粒上的抗生素抗性基因可作為________,其作用是有利于篩選出含有目的基因的細胞。氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細胞,而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neor的小鼠細胞,結合上圖推測,過程選用的2種限制酶是________(選填圖中的編號),圖中處的培養液應添加________________(填氨芐青霉素或G418 )。

2)若圖中過程選用的2種限制酶識別序列和切割位置分別是,則經這兩種限制酶切割后所產生的黏性末端是______。此時,圖中過程應選用______(E·coli DNA連接酶或T4DNA連接酶)。

3)據圖分析,細胞乙內除線粒體DNA外,還有________DNA分子;細胞乙發育成?芭叩倪^程中細胞分裂方式是____________,將細胞乙培養成桑椹胚的技術稱為________技術,該胚胎中每個細胞的體積變化是_______。

4)下列關于質粒運載體的說法正確的是________。

A.沒有限制酶就無法使用質粒運載體

B.質粒運載體只能在與目的基因重組后進入細胞

C.質粒運載體可能是從細菌或者病毒的DNA改造的

D.質粒運載體的復制和表達也遵循中心法則

E.質粒運載體只有把目的基因整合到受體細胞的DNA中才能表達

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